Kemilüminesans İmmünoassay (CLIA), oldukça hassas bir immünassay tekniğidir.
1. İlke
Kemilüminesans immünolojik testi, bağışıklık tepkisinin özgüllüğünü ve kemilüminesansın yüksek duyarlılığını birleştirir. Temel prensibi, antijen ve antikor arasındaki özgül bağışıklık tepkisini kemilüminesans reaksiyonuyla birleştirmektir. Spesifik olarak, test edilecek numunedeki antijen, bağışıklık kompleksi oluşturmak için özgül bir antikorla birleşir. Daha sonra, bir dizi kimyasal reaksiyon yoluyla, bağışıklık kompleksi bir kemilüminesans sinyali üretir. Lüminesans yoğunluğu, test edilecek antijenin konsantrasyonuyla orantılıdır ve test edilecek antijenin içeriği, lüminesans yoğunluğunun saptanmasıyla kantitatif olarak analiz edilebilir.
2. Ana bileşenler
Antikorlar: yakalama antikorları ve tespit antikorları dahil. Yakalama antikoru genellikle test edilecek antijeni yakalamak için katı faz taşıyıcıya sabitlenir. Tespit antikoru, bağışıklık kompleksindeki antijeni tespit etmek için bir kemilüminesans işaretleyici ile birleştirilir.
Katı faz taşıyıcı: Bağışıklık reaksiyonunu ve ayırma ve yıkamayı kolaylaştırmak için yakalama antikorunu sabitlemek amacıyla kullanılan mikroplakalar, manyetik boncuklar vb.
Kemilüminesans belirteç: Genellikle kimyasal reaksiyonda lüminesans sinyali üretebilen bir maddedir, örneğin luminol, akridinyum ester vb. Belirteç, bağışıklık reaksiyonundan sonra tespit antikoruyla birleşerek kemilüminesans sinyali üretir.
Tespit sistemi: Kemilüminesans sinyallerinin yoğunluğunu tespit edip okunabilir değerlere dönüştürmek için kullanılan lüminesans dedektörleri gibi ekipmanları içerir.
3. Özellikler
Yüksek hassasiyet: Geleneksel immünolojik analiz yöntemlerinden genellikle birkaç kat daha hassas olan, test maddesinin son derece düşük konsantrasyonlarını tespit edebilir.
Geniş doğrusal aralık: Test maddesinin içeriği, çoklu seyreltmelere gerek kalmadan geniş bir konsantrasyon aralığında doğru bir şekilde ölçülebilir.
Güçlü özgüllük: Antijen ve antikorun özgül bağlanmasına dayanarak, spesifik test maddeleri için oldukça seçicidir.
Hızlı: Tespit süreci nispeten hızlıdır ve sonuçlar genellikle daha kısa sürede elde edilebilir.
Yüksek otomasyon derecesi: Büyük ölçekli numunelerin tespiti için uygundur ve tespit verimliliğini artırmak için otomatik cihazlarla birlikte kullanılabilir.
4. Uygulama alanları
Klinik tanı: Hastalık tanısı, tedavi takibi ve prognoz değerlendirmesi için önemli bir temel oluşturmak amacıyla tümör belirteçleri, hormonlar, enfeksiyon hastalık belirteçleri vb. gibi çeşitli biyobelirteçlerin saptanmasında kullanılır.
İlaç geliştirme: İlaç konsantrasyonunun izlenmesi, etkinlik değerlendirmesi ve ilaç metabolizması araştırmaları için kullanılır.
Gıda güvenliği testleri: Gıdalarda zararlı maddelerin, pestisit kalıntılarının, veteriner ilaç kalıntılarının vb. tespiti.
Çevresel izleme: Çevredeki kirleticilerin ve toksik maddelerin tespiti.